haku: @instructor Ojamo, Heikki / yhteensä: 23
viite: 12 / 23
Tekijä:Weymarn, Niklas von
Työn nimi:Betaiinisynteesi geneettisesti muokatulla Escherichia colilla
Betaine biosynthesis in genetically modified Escherichia coli
Julkaisutyyppi:Diplomityö
Julkaisuvuosi:1999
Sivut:100      Kieli:   fin
Koulu/Laitos/Osasto:Kemian tekniikan osasto
Oppiaine:Bioprosessitekniikka   (Kem-70)
Valvoja:Leisola, Matti
Ohjaaja:Ojamo, Heikki
OEVS:
Sähköinen arkistokappale on luettavissa Aalto Thesis Databasen kautta.
Ohje

Digitaalisten opinnäytteiden lukeminen Aalto-yliopiston Harald Herlin -oppimiskeskuksen suljetussa verkossa

Oppimiskeskuksen suljetussa verkossa voi lukea sellaisia digitaalisia ja digitoituja opinnäytteitä, joille ei ole saatu julkaisulupaa avoimessa verkossa.

Oppimiskeskuksen yhteystiedot ja aukioloajat: https://learningcentre.aalto.fi/fi/harald-herlin-oppimiskeskus/

Opinnäytteitä voi lukea Oppimiskeskuksen asiakaskoneilla, joita löytyy kaikista kerroksista.

Kirjautuminen asiakaskoneille

  • Aalto-yliopistolaiset kirjautuvat asiakaskoneille Aalto-tunnuksella ja salasanalla.
  • Muut asiakkaat kirjautuvat asiakaskoneille yhteistunnuksilla.

Opinnäytteen avaaminen

  • Asiakaskoneiden työpöydältä löytyy kuvake:

    Aalto Thesis Database

  • Kuvaketta klikkaamalla pääset hakemaan ja avaamaan etsimäsi opinnäytteen Aaltodoc-tietokannasta. Opinnäytetiedosto löytyy klikkaamalla viitetietojen OEV- tai OEVS-kentän linkkiä.

Opinnäytteen lukeminen

  • Opinnäytettä voi lukea asiakaskoneen ruudulta tai sen voi tulostaa paperille.
  • Opinnäytetiedostoa ei voi tallentaa muistitikulle tai lähettää sähköpostilla.
  • Opinnäytetiedoston sisältöä ei voi kopioida.
  • Opinnäytetiedostoa ei voi muokata.

Opinnäytteen tulostus

  • Opinnäytteen voi tulostaa itselleen henkilökohtaiseen opiskelu- ja tutkimuskäyttöön.
  • Aalto-yliopiston opiskelijat ja henkilökunta voivat tulostaa mustavalkotulosteita Oppimiskeskuksen SecurePrint-laitteille, kun tietokoneelle kirjaudutaan omilla Aalto-tunnuksilla. Väritulostus on mahdollista asiakaspalvelupisteen tulostimelle u90203-psc3. Väritulostaminen on maksullista Aalto-yliopiston opiskelijoille ja henkilökunnalle.
  • Ulkopuoliset asiakkaat voivat tulostaa mustavalko- ja väritulosteita Oppimiskeskuksen asiakaspalvelupisteen tulostimelle u90203-psc3. Tulostaminen on maksullista.
Sijainti:P1 Ark TKK  4465   | Arkisto
Tiivistelmä (fin):Äärimmäisen halofiilisen Ectothiorhodospira halochloris -eubakteerin betaiinisynteesiä koodaavat geenit kloonattiin Escherichia coliin, jossa betaiinisynteesin merkitystä tutkittiin suola- ja sokeristressissä kasvavilla soluilla.

Työn kirjallisuusosassa tarkasteltiin E. colin sopeutumista kasvuympäristön aiheuttamaan osmoottiseen stressiin.
Kirjallisuusosassa selvitettiin myös osmolyyttien suojaavia ominaisuuksia ja ennen kaikkea paneuduttiin betaiinin merkitykseen osmolyyttinä.
Lopuksi käytiin lyhyesti läpi muita soluja stressaavia olosuhteita ja tarkasteltiin kirjallisuuden pohjalta onko betaiinilla havaittu olevan merkitystä myös näissä olosuhteissa.

Työn tutkimusosan alkuperäisenä tarkoituksena oli rekombinantti-E. coli-kantojen kasvattaminen fermentorimittakaavassa.
Plasmidistabiilisuusongelmien vuoksi päädyttiin kuitenkin hyvin aikaisessa vaiheessa takaisin pullomittakaavan kokeisiin.
Ensisijaiseksi tavoitteeksi muotoutui kyseisten stabiilisuusongelmien ratkaiseminen.
Stabiililla E. coli-kloonilla tutkittiin betaiinisynteesin ja betaiinin akkumuloitumisen merkitystä solun kasvuun korkean suola- ja sokeripitoisuuden aiheuttamassa osmoottisessa stressissä.
Lisäksi tehtiin alustavia kokeita, joissa selvitettiin akkumuloiko solu betaiinia, kun hapen saatavuus on rajoitettua.

Kloonatun de novo synteesireitin tuottaman betaiinin havaittiin stimuloivan E. coli XL1-Blue-kannan kasvua mineraalikasvuliuoksessa 0,3, 0,4, 0,5 ja 0,6 M NaCl-pitoisuuksissa.
Suolastressissä kasvava E. coli akkumuloi kuitenkin huomattavasti enemmän kasvuliuokseen lisättyä betaiinia kuin syntetisoimaansa betaiinia, jonka seurauksena myös parhaat solusaannot määritettiin kasvuliuoksissa, joihin oli lisätty betaiinia.
Tulokset viittaavat siihen, että de novo betaiinibiosynteesiä E. colissa rajoittaa pikemmin prekursoreiden (esim.
S-adenosyylimetioniini) saatavuus kuin kyseisten geenien ekspressiotaso.

Betaiinin syntetisointi stimuloi E. coli XLI-Blue-kannan kasvua myös korkeissa sakkaroosipitoisuuksissa (150 ja 200 g l [-1]).
Sen sijaan korkeassa glukoosipitoisuudessa E. coli ei hyötynyt betaiinisynteesireitistä.
Lisäksi havaittiin, että betaiinin syntetisointi stimuloi E. colin kasvua, kun hapen saatavuus oli rajoitettua.
ED:1999-06-18
INSSI tietueen numero: 14474
+ lisää koriin
INSSI