haku: @keyword solukalvo / yhteensä: 3
viite: 1 / 3
« edellinen | seuraava »
Tekijä:Liljeström, Mikko
Työn nimi:Set Up and Use of Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy
Valon kokonaisheijastukseen perustuvan fluoresenssimikroskoopin asennus ja käyttö
Julkaisutyyppi:Diplomityö
Julkaisuvuosi:2010
Sivut:vi + 59      Kieli:   eng
Koulu/Laitos/Osasto:Biotekniikan ja kemian tekniikan laitos
Oppiaine:Bioprosessitekniikka   (Kem-70)
Valvoja:Leisola, Matti
Ohjaaja:Hukkanen, Mika
OEVS:
Sähköinen arkistokappale on luettavissa Aalto Thesis Databasen kautta.
Ohje

Digitaalisten opinnäytteiden lukeminen Aalto-yliopiston Harald Herlin -oppimiskeskuksen suljetussa verkossa

Oppimiskeskuksen suljetussa verkossa voi lukea sellaisia digitaalisia ja digitoituja opinnäytteitä, joille ei ole saatu julkaisulupaa avoimessa verkossa.

Oppimiskeskuksen yhteystiedot ja aukioloajat: https://learningcentre.aalto.fi/fi/harald-herlin-oppimiskeskus/

Opinnäytteitä voi lukea Oppimiskeskuksen asiakaskoneilla, joita löytyy kaikista kerroksista.

Kirjautuminen asiakaskoneille

  • Aalto-yliopistolaiset kirjautuvat asiakaskoneille Aalto-tunnuksella ja salasanalla.
  • Muut asiakkaat kirjautuvat asiakaskoneille yhteistunnuksilla.

Opinnäytteen avaaminen

  • Asiakaskoneiden työpöydältä löytyy kuvake:

    Aalto Thesis Database

  • Kuvaketta klikkaamalla pääset hakemaan ja avaamaan etsimäsi opinnäytteen Aaltodoc-tietokannasta. Opinnäytetiedosto löytyy klikkaamalla viitetietojen OEV- tai OEVS-kentän linkkiä.

Opinnäytteen lukeminen

  • Opinnäytettä voi lukea asiakaskoneen ruudulta tai sen voi tulostaa paperille.
  • Opinnäytetiedostoa ei voi tallentaa muistitikulle tai lähettää sähköpostilla.
  • Opinnäytetiedoston sisältöä ei voi kopioida.
  • Opinnäytetiedostoa ei voi muokata.

Opinnäytteen tulostus

  • Opinnäytteen voi tulostaa itselleen henkilökohtaiseen opiskelu- ja tutkimuskäyttöön.
  • Aalto-yliopiston opiskelijat ja henkilökunta voivat tulostaa mustavalkotulosteita Oppimiskeskuksen SecurePrint-laitteille, kun tietokoneelle kirjaudutaan omilla Aalto-tunnuksilla. Väritulostus on mahdollista asiakaspalvelupisteen tulostimelle u90203-psc3. Väritulostaminen on maksullista Aalto-yliopiston opiskelijoille ja henkilökunnalle.
  • Ulkopuoliset asiakkaat voivat tulostaa mustavalko- ja väritulosteita Oppimiskeskuksen asiakaspalvelupisteen tulostimelle u90203-psc3. Tulostaminen on maksullista.
Sijainti:P1 Ark Aalto  3240   | Arkisto
Avainsanat:fluorescence microscopy
TIRF
live cell imaging
cell membrane
fluoresenssimikroskopia
elävien solujen kuvantaminen
solukalvo
Tiivistelmä (fin): Työn tarkoituksena oli ottaa Biomedicumin solukuvantamisyksikköön sijoitettu uusi kokonaisheijastukseen perustuva fluoresenssimikroskooppi (TIRF mikroskooppi) käyttöön.
Laite sijoitettiin Helsingin yliopiston Biomedicumin solukuvantamisyksikköön.

Kirjallisuusosassa käydään läpi fluoresenssiin perustuvan mikroskopoinnin perusteet solukuvantamisyksikön oletetun käyttäjän näkökulmasta.
Yleisesti käytössä olevien optisten segmentointimenetelmien perusteet käsitellään samoin kuin elävien solujen kuvantamisen erityisvaatimukset.

Valon kokonaisheijastuminen ja siitä seuraava eksponentiaalisesti häviävä energia-aalto ovat kirjallisuusosan keskeinen sisältö.
Tämän ilmiön käyttö fluoresoivien merkkiaineiden virittämiseen ja siitä seuraavan signaalin havaitsemiseen mikroskopialla käydään läpi.
Lisäksi käsitellään erilaiset TIRF mikroskoopin kokoonpanot.

Tutkimusosassa laitteiston asetukset tarkistetaan käyttäen karsinoomasolujen fluoresoivalla merkkiaineella leimattuja solun ja soluväliaineen välisiä tarttumarakenteita.
TIRF heijastuskulma, sen vaikutus fluoresenssia aiheuttavan energia-aallon syvyyteen sekä tämän syvyyden vaikutus kuvan kirkkauteen tarkastellaan.
Järjestelmän sopivuus elävien solujen kuvantamiseen arvioitiin fluoresoivalla VSVG3-GFP konstruktilla.
Lopuksi suoritettiin alustava arvio järjestelmän sopivuudesta solunsisäisen kolesterolin kuljetuksen kuvantamisessa käyttäen steroli-analogia ja spesifejä estoaineita.
Tiivistelmä (eng): The aim of this study was to set up a new total internal reflection (TIRF) microscope acquired by Biomedicum Imaging Unit, one of the core facility service units at the Meilahti medical campus of the University of Helsinki.

The existing literature was examined from the point of view of potential users of the imaging system, i.e. assuming a good working knowledge of cell biology and labelling procedures.
General information on fluorescence and the exploitation of this methodology in microscopy is dealt with, as are the general components of a fluorescence microscope.
Different optical sectioning techniques and live cell imaging are also discussed.

TIRF and the resultant evanescent wave are discussed in more detail as are the configurations of a microscope setup to utilize this phenomenon in functional fluorescence microscopy.

In the experimental part of the work, the verification of the system setup was done using cultured carcinoma cells with fluorescently labelled cell-substrate adhesion sites.
The effect of the TIRF angle on the penetration depth of the evanescent field in cells, and the resultant image intensity was analyzed.
The suitability of the system for live cell imaging was evaluated using fluorescent VSVG3-GFP constructs.
Finally, preliminary feasibility studies were performed on a sterol analog transport together with specific inhibitions to evaluate the usefulness of TIRF techniques in future studies of cholesterol transport.
ED:2010-07-05
INSSI tietueen numero: 39804
+ lisää koriin
« edellinen | seuraava »
INSSI