haku: @instructor Nevanen, Tarja / yhteensä: 4
hakutulos-lista
viite: 3 / 4
« edellinen | seuraava »
Tekijä:Arola, Henri
Työn nimi:Development of novel antibodies by phage display technology
Uusien vasta-aineiden kehittäminen faaginäyttö-teknologialla
Julkaisutyyppi:Diplomityö
Julkaisuvuosi:2011
Sivut:iii + 115 + [9]      Kieli:   eng
Koulu/Laitos/Osasto:Kemian laitos
Oppiaine:Biokemia ja mikrobiologia   (Kem-30)
Valvoja:Nordström, Katrina
Ohjaaja:Nevanen, Tarja
OEVS:
Sähköinen arkistokappale on luettavissa Aalto Thesis Databasen kautta.
Ohje
sulje

Digitaalisten opinnäytteiden lukeminen Aalto-yliopiston Harald Herlin -oppimiskeskuksen suljetussa verkossa

Oppimiskeskuksen suljetussa verkossa voi lukea sellaisia digitaalisia ja digitoituja opinnäytteitä, joille ei ole saatu julkaisulupaa avoimessa verkossa.

Oppimiskeskuksen yhteystiedot ja aukioloajat: https://learningcentre.aalto.fi/fi/harald-herlin-oppimiskeskus/

Opinnäytteitä voi lukea Oppimiskeskuksen asiakaskoneilla, joita löytyy kaikista kerroksista.

Kirjautuminen asiakaskoneille

  • Aalto-yliopistolaiset kirjautuvat asiakaskoneille Aalto-tunnuksella ja salasanalla.
  • Muut asiakkaat kirjautuvat asiakaskoneille yhteistunnuksilla.

Opinnäytteen avaaminen

  • Asiakaskoneiden työpöydältä löytyy kuvake:

    Aalto Thesis Database

  • Kuvaketta klikkaamalla pääset hakemaan ja avaamaan etsimäsi opinnäytteen Aaltodoc-tietokannasta. Opinnäytetiedosto löytyy klikkaamalla viitetietojen OEV- tai OEVS-kentän linkkiä.

Opinnäytteen lukeminen

  • Opinnäytettä voi lukea asiakaskoneen ruudulta tai sen voi tulostaa paperille.
  • Opinnäytetiedostoa ei voi tallentaa muistitikulle tai lähettää sähköpostilla.
  • Opinnäytetiedoston sisältöä ei voi kopioida.
  • Opinnäytetiedostoa ei voi muokata.

Opinnäytteen tulostus

  • Opinnäytteen voi tulostaa itselleen henkilökohtaiseen opiskelu- ja tutkimuskäyttöön.
  • Aalto-yliopiston opiskelijat ja henkilökunta voivat tulostaa mustavalkotulosteita Oppimiskeskuksen SecurePrint-laitteille, kun tietokoneelle kirjaudutaan omilla Aalto-tunnuksilla. Väritulostus on mahdollista asiakaspalvelupisteen tulostimelle u90203-psc3. Väritulostaminen on maksullista Aalto-yliopiston opiskelijoille ja henkilökunnalle.
  • Ulkopuoliset asiakkaat voivat tulostaa mustavalko- ja väritulosteita Oppimiskeskuksen asiakaspalvelupisteen tulostimelle u90203-psc3. Tulostaminen on maksullista.
Sijainti:P1 Ark Aalto  2031   | Arkisto
Avainsanat:phage display
antibody
Fab
hapten
faaginäyttö
vasta-aine
hapteeni
Tiivistelmä (fin): Työssä kehitettiin uusia rekombinanttivasta-aineita haasteellisille pienimolekyyleille (hapteeneille) rakentamalla vasta-ainekirjasto, josta seulottiin spesifisiä sitoutujia.
Immunisoinnissa käytetyt hapteenit olivat trijodotyroniini (T3) ja tyroksiini (T4), jotka ovat kilpirauhashormoneja sekä homovanilliinihappo (HVA) ja hydroksi-indolyyliasetaatti (5-HIAA), jotka ovat katekolamiinimetaboliitteja.

Vasta-ainekirjasto rakennettiin monistamalla hiiren IgG geeneistä erikseen raskas- ja kevytketjut ja yhdistämällä ne samaan vektoriin Fab-fragmenteiksi.
Valmiin vasta-ainekirjaston koko oli 108 erilaista kloonia.
Fab-fragmentit ilmennettiin filamentti-bakteriofagien pinnalla, jonka jälkeen spesifisiä vasta-aineita tehoseulottiin samanaikaisesti kaikille neljälle hapteenille käyttämällä automaattista magneettihelmien käsittelijää.
Eristetyt kloonit analysoitiin ELlSA-testillä automatisoidun robottiaseman avulla ja lupaavimmat kloonit sekvensoitiin niiden diversiteetin selvittämiseksi.

Vasta-ainekirjastosta saatiin eristettyä yhteensä 15 eri anti-T3 kloonia, 18 anti-T4 kloonia, 4 anti-HVA kloonia ja 16 anti-5-HIAA kloonia.
Tämä osoittaa, että multi-immunisoitu vasta-ainekirjasto ja tehoseulonta tuottavat tehokkaasti vasta-aineita monenlaisille pienmolekyyleille.
Lisäksi multi-immunisointi vähentää koe-eläinten tarvetta, työmäärää ja kuluja.
Tarvittaessa lukuisat työssä eristetyt vasta-ainekloonit tarjoavat erinomaisen lähtökohdan niiden ominaisuuksien parantamiseksi mutageneesilla.
Tiivistelmä (eng): In the present work, novel antibodies against four small and challenging molecules (haptens) were developed by construction, selection and screening of an antibody library.
The haptens used in immunization were two thyroid hormones triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4) and two catecholamine metabolites homovanillic acid (HVA) and 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA).

The antibody library was constructed by cloning the heavy and light chain regions from mouse IgG genes sequentially into a phagemid vector.
The functional library size was 108.
These Fab fragments of antibodies were displayed on filamentous bacteriophages and specific antibodies were selected in a high-throughput format against the four antigens in parallel.
The selected clones were screened by using an ELISA test in automated robotic station.
The clones from the primary screening were further characterized by secondary ELISA.

The most promising clones were sequenced to see their diversity.
Altogether 15 different anti-T3 clones, 18 anti-T4 clones, 4 anti-HVA clones and 16 anti-5-HIAA clones were obtained, indicating that the used high throughput screening method from a multi-immunized library is a robust method and widely applicable for developing binders against various small molecules.
In addition, the multi-immunization saves animals, time and costs.
If needed, the multiple antibody clones provide excellent material for improving their properties by mutagenesis.
ED:2011-12-15
INSSI tietueen numero: 43259
+ lisää koriin
« edellinen | seuraava »
INSSI